A)

Coletar ácaros adultos no campo. Recomenda-se uma população de pelo menos 10 ácaros adultos por folha.

B)

Recolha uma quantidade de folhas não tratadas. Para P. ulmi, podem ser utilizadas folhas de macieira. No entanto, a utilização de folhas de arbustos relacionados, como o mirabolano (Prunus cerasifera), proporciona um substituto experimental mais duradouro.

C)

Prepare os líquidos de teste. O uso de umectante não é recomendado (consulte a nota).

D)

Agite os líquidos de teste e mergulhe as folhas individualmente por 5 segundos. Deixe o líquido da superfície das folhas secar antes de colocá-las nas placas de Petri. Utilize no mínimo cinco réplicas por tratamento.

E)

Coloque uma camada de algodão sobre a base da placa de Petri. Adicione água da torneira até o ponto de saturação, mas evite o acúmulo de água parada.

F)

Coloque as folhas tratadas, com a superfície superior voltada para cima, sobre a base de algodão umedecido.

G)

Corte tiras de algodão com aproximadamente 1 cm de largura e mergulhe-as em água da torneira. Coloque tiras de algodão ao redor do perímetro de cada folha tratada, metade sobre a folha e metade sobre a camada de algodão. Coloque um pequeno pedaço de algodão umedecido ao redor do pecíolo de cada folha.

H)

Utilize um microscópio binocular ou uma lupa para garantir que não haja espaços entre as folhas e as tiras de algodão. Remova quaisquer ácaros que já estejam nas folhas.

I)

Utilize um pincel fino de marta para colocar 10 ácaros fêmeas adultas na superfície de cada folha tratada.

J)

Manter os testes a 21 ± 3°C em uma sala onde não estejam expostos à luz solar direta e com umidade relativa de 65-90%. As placas de Petri devem ser deixadas abertas.

K)

Utilizando uma lupa ou um microscópio binocular, avalie a mortalidade após 72 ou 96 horas, dependendo da velocidade de ação do composto testado. Use um pincel fino de pelo de marta para estimular os ácaros individualmente. Se forem incapazes de andar, registre-os como mortos.

L)

Expresse os resultados como porcentagem de mortalidade e corrija a mortalidade em animais não tratados usando a fórmula de Abbott. A mortalidade não tratada deve ser registrada.